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TTC染色

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一、染色机制:

  TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是脂溶性光敏感复合物,1894年首次合成用来检测种子的生存能力,1958年开始用来染色检测哺乳动物组织的缺血梗塞。它是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体,与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈现苍白色。

二、染色步骤:

  1、取材:动物麻醉后立即取新鲜组织(如脑、心脏),不经固定液固定,将组织直接放入-20℃速冻20-30min,如果不急用,可以暂时放置-80℃冻存

  2、组织块切片:将冻好的组织稍解冻,用莱卡刀片手动切片,厚度2-3mm为宜,切面整齐。

  3、TTC染色:将切片放入提前预热好的的TTC孵育液中,放入37℃水浴锅中避光孵育 15-30min,间隔5-8min轻轻摇动组织,使其均匀接触到染色液,并观察染色结果

  4、拍照:组织成色后,加入固定液终止反应,并避光保存组织,照相机拍照。

三、实验结果:

  组织正常区呈红色,梗死区呈苍白色。


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