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刚果红染色

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一、染色机制:

  淀粉样蛋白对刚果红有选择性亲和力,因此容易着染。刚果红是一种分子为长线状的偶氮染料,其上的氨基容易与淀粉样蛋白的羟基结合,平行地附着在淀粉样蛋白的纤维上而显色。

二、染色应用:

  淀粉样蛋白常沉积于小血管壁和浸润在细胞间隙,呈云朵样或片块状结构。可用刚果红染色来判定淀粉样蛋白的沉积。如皮肤真皮乳头层内的淀粉样蛋白沉积、慢性结膜炎时在透明样变的纤维组织内见到的淀粉样变、肺的淀粉样瘤、老年痴呆症脑的淀粉样蛋白沉积、甲状腺髓样癌和胰岛细胞瘤的淀粉样蛋白沉积。

  在偏光镜下观察,淀粉样蛋白呈绿色双折光;在荧光镜下,淀粉样蛋白呈现红光。

三、染色步骤:

  1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗。

  2、刚果红染色:切片入刚果红染液1h,自来水洗2min。

  3、背景分化:氢氧化钾溶液分化,至阳性斑块明显,背景基本无色,自来水洗。

  4、苏木素染色:切片入苏木素染液染3-5min,自来水洗,分化液分化,自来水洗,返蓝液返蓝,流水冲洗。

  5、脱水封片:切片依次放入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明,中性树胶封片。

  6、显微镜镜检,图像采集分析。

四、实验结果:

  淀粉样蛋白呈红色,细胞核呈浅蓝色。


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