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首页 > 实验室 > TRAP染色(抗酒石酸酸性磷酸酶染色)

TRAP染色(抗酒石酸酸性磷酸酶染色)

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一、染色机制:

  Trap是酸性磷酸梅(ACP)同功酶6种同工酶(0-5)中的第5型,破骨细胞(OC)含量最为丰富,通常作为鉴别OC的重要标志。Trap染色结果显示OC胞浆阳性,呈酒红色,核呈阴性。

二、染色步骤:

  1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗,蒸馏水洗三遍。

  2、工作液配制:亚硝酸钠与副品红溶液各取500ul混合均匀,加入醋酸钠缓冲溶液18ml混匀,再加入萘酚AS-BI磷酸酯液1ml,称取酒石酸钾钠0.282g最后加入,充分溶解即为工作液。

  3、孵育染色:滴加工作液于组织切片上,置于37℃孵育1-2h,蒸馏水洗3遍。

  4、苏木素染色:切片入苏木素染液染3-5min,自来水洗,分化液分化,自来水洗,返蓝液返蓝,流水冲洗。

  5、脱水封片:切片依次放入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲苯Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明,中性树胶封片。

  6、显微镜镜检,图像采集分析。

三、实验结果:

  破骨细胞胞浆呈酒红色,核浅蓝色。


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