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分子病理检测分类有哪些?

      人体器官由细胞组成,传统的病理科是对细胞的形态进行分析,而细胞是由分子组成的,分子病理检测就是对组成细胞的分子进行检测分析,比细胞更进一步,更为精准。


    分子病理检测目前可以分为两大类:一类是建立在形态学基础上的(比如HER2荧光原位杂交、显色原位杂交等)检测。另一类是建立在PCR平台上的(测序、荧光定量PCR)基因检测。

  1、显色原位杂交(CISH)

  显色原位杂交的基础原理是核酸分子单链间的碱基互补,将标记有地高辛或生物素的探针与待测的DNA或RNA互补配对后,从而将该位置标记出来。又将待测基因的不同分为:DNA原位杂交(主要应用于基因定位、特定基因检测等)和RNA原位杂交(主要应用于基于表达检测)。显色原位杂交的优点是操作简单、信号稳定、存储方便。是当前应用最广泛的分子病理诊断技术之一。


  2、荧光原位杂交(FISH)

  这是在20世纪80年代末在放射原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射分子细胞遗传技术,以荧光标记取代同位素标记而形成的额一种新的原位杂交方法,探针首先与某种介导分子结合,杂交后再通过免疫细胞化学过程连接上荧光染料。其基本原理是利用同源互补的待检染色体与用生物素、地高辛标记过的核酸探针,经变性-退火-复性,形成待检DNA与核酸谈真的杂交体。使探针与荧光素标记的特异亲和素之间发生免疫化学反应,最后用荧光显微镜对待检DNA进行定性、定量或相对定位分析。和CISH相比,FISH更加安全、快捷、特异性好、定位准确。


  3、聚合酶链反应(PCR)

  是一种对特定的DNA片段在体外进行快速扩增的新方法,通过模拟体内DNA复制到方式,在体外选择性地将DNA某个特殊区域扩增出来的技术,它包括变性、退火、延伸三个步骤。该技术检测的是组织、细胞中病毒的DNA。


  4、基因芯片(DNA芯片或DNA微阵列)

  基因芯片的原理是将样品分子DNA/RNA扩增、转录等技术后与DNA芯片的已知序列进行杂交,在计算机的综合分析下,获得样品中基因表达的信息。基因芯片是将已知的DNA/cDNA片段大量集成在固体载体上而得名。基因芯片采用的是已知探针,可以在一次实验中自动、快速完成数千条序列的检测。


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